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心肺复苏大鼠海马神经元磷脂酰肌醇-3-激酶、蛋白激酶B和磷酸化cAMP应答元件结合蛋白表达的变化及APP17肽的影响

作者:王晶 路毅 赵妍 秦俭 王蓉 赵志炜心肺复苏蛋白激酶b磷酸化camp应答元件结合蛋白app17肽

摘要:目的探讨心肺复苏后大鼠海马神经元磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,P13K)、蛋白激酶B(protein kirmse B,PKB)、磷酸化cAMP应答元件结合蛋白(phosphorylation of cAMP response elementb inding protein,p-CREB)表达的变化,以及APP17肽对它们的影响。方法实验地点在宣武医院神经变性病学重点实验室。雄性Wistar大鼠21只,随机分3组,每组7只:假手术对照组(A组)、心肺复苏组(B组)、心肺复苏+APP17肽组(C组)。自主呼吸循环恢复(return of spontaneous circulation,ROSC)标准为心电图出现正常的QRS波群,心室内压≥60mmHg,持续10min以上;夹闭气管制作大鼠心跳呼吸停止模型,行心肺复苏。当大鼠出现ROSC时,复苏组静脉注射生理盐水;APP17肽组静脉注射APP17肽10μg·(300g)^-1。对照组行假手术,静脉注射生理盐水。维持生命体征至2h,断头取脑,行冰冻切片。应用免疫组化法观察3组大鼠复苏2h后海马神经元P13K,PKB,p-CREB表达情况;三组中各取1只大鼠于ROSC后2h,分离海马;应用Westem-blot方法测定海马神经元PKB,p-CREB蛋白含量。数据以均数±标准差(x±s)表示,组间数据用方差分析,以P〈0.05为差异具有统计学意义。结果免疫组化法显示:B组P13K阳性细胞表达为(2.75±1.80),略高于A组(2.53±1.53),差异没有统计学意义;而C组为(5.85±2.83),较B组增加,差异具有统计学意义(P〈0.01)。B组PKB和p-CREB阳性细胞分别较A组明显减少[(2.45±1.36)VS.(5.22±2.50),(P〈0.05);(2.41±1.11)VS.(8.314±3.02),P〈0.01];C组PKB和p-CREB阳性细胞分别较B组增高[(9.66±4.32)VS.(2.45±1.36),P〈0.01;(14.18±3.96)VS.(2.41±1.11),P〈0.01]。Western-blot法测定PKB,p-CREB蛋白含量B组较A组明显减少;C组较B组明显增加。结论心肺复

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