作者:刘国政; 李一荣; 吴健民荧光pcr技术探针杂交技术基因多态性亚甲基四氢叶酸还原酶定量检测实时荧光熔解曲线c677t限制性片段长度多态性
摘要:聚合酶链反应.限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)是当前常用的检测基因多态性的方法之一,该法不仅操作时间长,且在采用限制性内切酶对PCR产物进行酶切后,通常采用溴乙锭或银染的方法观察结果。溴乙锭严重危害人体健康,而银染试剂相当不稳定。因此有必要建立一种快速且对人体危害性较低的多态性检测方法。实时荧光聚合酶链反应(PCR)是一种将先进的光学技术、温控技术、荧光素标记技术以及计算机软件有机结合的新型PCR,能够对PCR每一个循环的荧光强度进行监测,故称为实时荧光PCR。双探针杂交技术是一种重要的实时荧光PCR技术,通常用于基因的定量检测,但是如果结合探针熔解曲线则可用于基因多态性和突变的检测。
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