作者:郑佐娅; 李卫鹏; 王红; 王从珠; 杭勤; 赵...钠尿肽重组融合蛋白质类
摘要:目的从构建了人氨基末端脑利钠肽(amino-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP)基因的表达菌中抽取目的蛋白,并对其进行纯化、鉴定及稳定性的初步研究. 方法取表达菌株BL21-pGEX-4T-3-NT-proBNP,IPTG诱导表达,GSH-agarose 亲和纯化目的蛋白,提纯产物进行SDS-PAGE电泳和Western blot 鉴定,并采用自动免疫分析仪检测其免疫反应性和稳定性.结果 GST- NT-proBNP融合蛋白表达水平高,可溶性好.SDS-PAGE、免疫测定分析显示其相对分子量为34 600,具有较高的特异免疫反应性和稳定性.结论 NT-proBNP能通过基因工程手段以GST融合蛋白的形式大量获取,在非变性条件下得到的GST- NT-proBNP有较好的免疫反应活性和稳定性.
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