作者：王亚娟; 沈叙庄; 高薇; 俞桑洁; 林影; 王...凝固酶葡萄球菌属基因多态性限制性片段长度
摘要：目的建立快速凝固酶阴性葡萄球( CNS)菌种的基因鉴定方法.方法对培养获得的、经Auto Scan-4微生物分析仪和API Staph鉴定系统鉴定为CNS的100株临床分离菌株和质控菌株应用tRNA基因间长度多态性PCR分析(tDNA-PCR)和肠杆菌基因间相同序列(ERIC)两种分子生物学方法进行常见的CNS菌种鉴定,同时改良实验条件,并将tDNA-PCR及ERIC-PCR两种分子生物学方法的鉴定结果与传统的Auto Scan-4微生物分析仪和API Staph鉴定系统进行比较.结果 tDNA-PCR及ERIC-PCR两种分子生物学方法对质控菌株及经Auto Scan-4微生物分析仪和API Staph系统鉴定的12种临床分离CNS菌株均可以得到各自不同的电泳图谱,它们可以快速、准确地对常见12种CNS,包括表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、人葡萄球菌、华纳葡萄球菌、模仿葡萄球菌、孔氏葡萄球菌、心耳葡萄球菌、松鼠葡萄球菌、头状葡萄球菌、施氏葡萄球菌、木糖葡萄球菌和里昂葡萄球菌进行菌种鉴定.从图谱的肉眼观察看,12种CNS均可以很好地鉴别开.tDNA-PCR及ERIC-PCR与Auto Scan-4和API Staph鉴定系统的一致率为95%.经Taq酶聚合后进行电泳,tDNA-PCR在100～600bp产生6～10条DN段;ERIC-PCR在100～1200 bp仅产生1～8条DNA 片段.结论 tDNA-PCR及ERIC-PCR是快速、敏感的CNS菌种鉴定的方法,具有高度的特异性.
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