作者：胡成进; 沈茜; 陈英剑; 闻新棉实时荧光定量法荧光定量逆转录聚合酶链反应初步应用基因表达水平乳腺癌组织gapdh乳腺癌相关基因pcr检测方法mrna正常乳腺荧光定量技术软件分析green癌组织标本相关性研究家族成员
摘要：目的建立人乳腺癌相关基因组织型激肽释放酶基因家族成员Kallikrein6 (klk6)mRNA荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-PCR)检测方法,以检测正常乳腺和乳腺癌组织中klk6基因表达水平.方法以GAPDH作参照,用SYBR Green I荧光定量技术,建立检测klk6 mRNA的FQ-PCR方法;并检测32份正常乳腺和乳腺癌组织标本的循环阈值(Ct),然后,通过REST软件分析klk6 mRNA的表达水平.结果 FQ-PCR方法对GAPDH和klk6 mRNA的扩增效率分别为0.90和0.95,批内变异系数(CV)分别为1.0%～2.1%和0.8%～1.2%,批间CV分别为3.2%和3.9%.正常乳腺和乳腺癌组织的klk6对GAPDH的相对表达量分别为0.017±0.009和0.040±0.017.用REST软件分析,提示乳腺癌组织klk6表达水平上调.结论建立的klk6 mRNA FQ-PCR检测方法简便,特异,重复性好,可信度高,可用于klk6基因表达水平与肿瘤相关性研究.
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