作者：黄燕萍; 王宇明; 兰林; 范燚; 赵文利拉米夫定患者单链构象多态性准种治疗后治疗前后乙肝病毒双链种数克隆测序
摘要：目的应用单链构象多态性/异源双链分析技术研究慢性乙型肝炎患者拉米夫定治疗前后乙肝病毒准种组成的改变.方法聚合酶链反应扩增6例患者治疗前后共12份血清标本中目的片段并逐一分析.结果拉米夫定治疗前患者体内乙肝病毒聚合酶基因序列准种组成较复杂,准种数在7～14(平均9.8),均高于治疗后准种数4～8(平均5.7),t=3.98,P＜0.05.6例患者治疗前的准种分布中有一种或两种优势准种,但比例较低(33.3%～81.8%);治疗后显著升高(78.8%～90.9%),t=3.24,P＜0.05.选择优势克隆测序,6例患者经拉米夫定治疗后2例在酪氨酸-蛋氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸(YMDD)序列出现M550V/L528M,3例为M550I变异,1例无变异.结论采用单链构象多态性/异源双链分析技术对人体内病毒作整体性的研究,可避免其他研究方法的片面性,为发现新的变异点提供机会,进一步解释拉米夫定的耐药机制.
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