荧光成像技术活体示踪裸鼠肝细胞癌肺转移

作者：叶志强 刘旭辉 吴飞龙 赵坤 潘卫东癌肝细胞肝肿瘤实验性小鼠裸荧光素酶类细菌活体成像活体示踪肿瘤转移

摘要：目的探讨荧光素酶标记肝细胞癌（肝癌）细胞的荧光成像技术在活体示踪裸鼠肝癌肺转移中的价值。方法应用低转移潜能 HCC97L、高转移潜能HCC97H 肝癌细胞建立稳定表达荧光素酶的肝癌细胞株 HCC97L-FL、HCC97H-FL。24只裸鼠按随机数字表法随机分为HCC97L-FL 组和 HCC97H-FL 组。分别将5＆#215;106个 HCC97L-FL 和 HCC97H-FL 细胞加入磷酸盐缓冲液（PBS）50μl，制成细胞悬液。将细胞悬液注入裸鼠尾静脉，建立荧光素示踪的裸鼠肝癌肺转移模型。观察荧光成像示踪肺转移瘤大体标本及组织标本情况。两组数据比较采用 t 检验。结果荧光检测发现，HCC97L-FL、HCC97H-FL 细胞均可发出强烈荧光。建模后2～3周，HCC97H-FL 组裸鼠的肺部收集到荧光信号，3～4周荧光强度逐渐增强；HCC97L-FL 组裸鼠无可见的肺部荧光信号。建模后4周 HCC97H-FL 组荧光强度为（1.73±0.16）×10^4 a.u.，明显高于 HCC97L-FL 组的（0.03±0.01）×10^4 a.u.（t=23.652, P〈0.05）。建模后4周 HCC97H-FL 组裸鼠肺脏密布大小不等转移瘤病灶，部分较大病灶突出于肺脏表面；HCC97L-FL 组中未观察到转移瘤。转移瘤癌细胞核异型性明显，具备肝癌特征。结论荧光素酶标记肝癌细胞的荧光成像技术可对裸鼠肝癌肺转移进行活体、动态示踪。该技术为体内肝癌细胞生长、侵袭、转移的研究提供了可靠的量化研究手段。

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