作者：王鹏程; 张英泽; 陈百成; 李东风牵拉对照组三维培养opn明胶海绵细胞数目mc3alp组培培养液
摘要：目的研究三维培养的克隆的鼠颅骨成骨样细胞(colonal munne calvarial osteoblast-likecell line,MC3T3-E1)在特定的周期性牵拉应力刺激下的增殖能力、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性及骨桥蛋白(osteopontin,OPN)mRNA表达的变化,探讨牵拉应力对成骨细胞的生物学效应.方法以明胶海绵(2.00cm×2.00cm×O.25 cm)作为MC3T3-E1的三维培养支架,每块明胶海绵种植细胞悬液100μl,细胞数目为1.25×105个.明胶海绵拉伸度为5%,频率60 cycles/min,15 min/h,牵拉后2、4、6、8、10 d分别从牵拉组和对照组中各取3个样本,行细胞计数、细胞及培养液的ALP活性测定、细胞的OPN mRNA测定.结果牵拉后第2d牵拉组的细胞数目即多于对照组(P＜0.05),细胞倍增时间从71 h提前至55 h.除第2 d外,牵拉组细胞的ALP活性低于对照组(P＜0.05),两组培养液中ALP活性均处于低水平,差异无统计学意义.各时相牵拉组OPN mRNA的表达整体水平高于对照组,对照组第4 d OPN mRNA的表达接近牵拉组,其余各时相均低于牵拉组(P＜0.05).结论周期性牵拉应力促进三维培养的MC3T3-E1细胞增殖,抑制细胞的ALP活性,促进OPN的合成,增强细胞的分化能力.
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