作者：李晓燕; 朱平; 樊春梅; 王彦宏; 贾俊峰; ...特异性细胞胶原诱导体液免疫反应特异性免疫应答细胞内细胞因子流式细胞术体液免疫应答胶原性关节炎脾脏淋巴细胞
摘要：目的观察并比较C57BL/6小鼠初次和加强免疫Ⅱ型胶原后的特异性细胞及体液免疫应答,探讨特异性免疫应答在胶原诱导关节炎发病中的意义.方法用鸡Ⅱ型胶原(CⅡ)在C57BL/6小鼠尾部皮内注射,诱导胶原性关节炎(CIA).分别取初次免疫后19 d及加强免疫后7、28 d CIA小鼠脾脏淋巴细胞,CⅡ体外刺激扩增后,采用5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)掺入法和流式细胞术分别测定其扩增情况和表型;并通过流式细胞术测定外周血中细胞内细胞因子干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-4的水平分析Th1和Th2亚群的变化;同时用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定不同时期CIA模型血清中抗CⅡ抗体的表达.结果①免疫后不同时间,CIA模型组外周血中CD4+IFN-γ+细胞百分率明显高于对照组(P＜0.01),但CIA模型组内不同时间CD4+IFN-γ+细胞百分率差异无统计学意义;②特异性增生实验显示,CIA模型组CD4+T细胞中BrdU+细胞率均高于对照组,但加强免疫后BrdU+细胞率明显低于初次免疫(72±6)%,并且有逐渐降低的趋势;初次免疫后CD4+IFN-γ+细胞百分率为(13±4)%,加强免疫后阳性细胞百分率也下降;③ELISA法测定不同时间血清中CIA模型组抗CⅡ抗体水平,28 d吸光度(A)值达到最高,其后逐渐减低,到35 d左右(即加强免疫后14 d)出现较低的抗体水平.结论C57BL/6小鼠加强免疫反应中特异性T细胞和B细胞的低免疫应答状态是其发病率较低和多关节炎症状较轻的主要原因,为进一步研究CIA及人类类风湿关节炎(RA)的发病机制及治疗方案提供新的线索.
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