作者：戴岚 顾李颖 祝捷 施君 王瑶 季芳 狄文子宫内膜异位症问质细胞微rnas细胞黏附细胞运动
摘要：目的探讨微小RNA-199a（miR-199a）对子宫内膜异位症（内异症）患者在位子宫内膜间质细胞黏附、迁移和侵袭能力的调控作用。方法利用脂质体lipofectamine2000将成熟miR一199a模拟物（转染组）和阴性对照物（对照组）转染人子宫内膜间质细胞。采用黏附试验检测转染后细胞的体外黏附能力，划痕试验和迁移实验检测转染后细胞的迁移能力，重组细胞基底膜侵袭实验检测细胞的侵袭能力。运用荧光素酶报告基因试验验证核因子KB（NF—KB）抑制蛋白激酶B（IKKJ3）是miR-199a的靶基因。应用蛋白印迹法检测IKKl3、NF—KB抑制蛋白α（IKB-α）、磷酸化IKB-Ot（p-IKB-Ot）和NF-KB蛋白的表达。结果（1）细胞黏附能力：转染组细胞的黏附抑制率为（14±4）％，明显高于对照组细胞（0），差异有统计学意义（P〈0．01）。（2）细胞迁移和侵袭能力：划痕试验显示，转染组细胞48h后，划痕愈合程度低于对照组；迁移试验显示，转染组和对照组穿膜细胞数分别为（130±31）、（247±36）个／高倍视野（×200），两组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）；侵袭试验显示，两组穿透基底膜细胞数分别为（63±15）、（133±17）个／高倍镜，两组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。（3）荧光素酶的表达水平：荧光素酶报告基因试验显示，转染组和对照组细胞的荧光素酶表达水平分别为0．160±0．006和0．383±0．083。两组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。（4）蛋白表达水平：与对照组细胞蛋白表达水平（设定为1．000）比较，转染组细胞中IKKB、p-IKB-d、IKB-Ot和NF-KB蛋白的表达水平分别为0．350±0．195、0．443±0．076、1．970．4-0．486和0．454±0．147，两组比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论miR-199a能抑制人子宫内膜问质细胞的黏附、迁移和侵袭能力；IKKIB为miR-199a的靶基�
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