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丝裂原活化蛋白激酶信号传导通路对猪卵巢颗粒细胞分泌功能的调节作用

作者:邱学敏 刘阳 丛晶 吴效科卵巢粒层细胞丝裂原激活蛋白激酶类类黄酮物质福司柯林

摘要:目的探讨丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号传导通路对猪卵巢颗粒细胞分泌功能的调节作用。方法将体外培养的猪卵巢颗粒细胞分为两组,分别加入浓度为50μmo//L的二甲基亚砜(DMSO)和MAPK抑制剂——PD98059(PD),作用48h后,将加入DMSO的细胞分为两组,观察1组细胞加入浓度为20μmol/L的腺苷酸环化酶激活剂,不加腺苷酸环化酶激活剂的为对照1组;将加入PD的细胞也分为两组,观察2组细胞加入浓度为20μmol/L的腺苷酸环化酶激活剂,不加腺苷酸环化酶激活剂的为对照2组,继续作用48h。以化学发光法测定4组细胞中睾酮、孕酮和雌二醇的水平;用RT-PCR技术检测17α羟化酶(CYP17)和细胞色素芳香酶P450的基因表达,以扩增产物的灰度比(GSR)表示。结果(1)生殖激素水平:对照1组睾酮、孕酮、雌二醇水平分别为(29.5±2.5)nmol/L、(80±5)nmol/L、(49±4)pmol/L,对照2组分别为(42.3±3.4)nmol/L、(170±15)nmol/L、(75±6)pmol/L,两组比较,差异有统计学意义(P〈0.05);观察2组睾酮、孕酮、雌二醇水平分别为(106.2±7.6)nmol/L、(210±16)nmol/L、(130±11)pmol/L,观察1组分别为(47.2±3.5)nmol/L、(130±6)nmol/L、(81±6)pmol/L,两组比较,差异也有统计学意义(P〈0.05);(2)酶表达变化:对照2组与对照1组比较,CYP17mRNA表达增强50%,而芳香酶P450mRNA表达下降20%,观察2组与观察1组比较,芳香酶P450、CYP17mRNA表达均增强,且以CYP17mRNA表达增强更明显,达到125%。结论MAPK信号传导通路对猪卵巢颗粒细胞的分泌功能具有抑制作用。

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