作者：李小永; 李荷莲; 郑桂英抗生素类肽促性腺素释放激素重组遗传受体lhrh杆状病毒科细胞系肿瘤
摘要：目的构建天蚕素B-黄体生成素释放激素结合部位（CB-LHRH’）重组基因，探讨CB-LHRH’蛋白成为新型抗肿瘤靶向药物的可能性。方法设计并人工合成CB-LHRH’重组基因序列，应用昆虫细胞．杆状病毒表达系统表达目的蛋白并通过蛋白斑点印迹法鉴定，采用二甲氧唑黄（XTT）比色法检测不同剂量的目的蛋白对卵巢上皮性癌细胞株SKOV3（LHRH受体阴性）和子宫内膜癌细胞株HEC-1B（LHRH受体阳性）细胞的生长抑制率，并进行镜下形态观察。结果蛋白斑点印迹法检测结果显示，重组杆状病毒感染的Si9细胞裂解液呈现棕色，证实CB-LHRH’蛋白已表达。重组杆状病毒感染的昆虫细胞系Sf9细胞裂解液对SKOV3及HEC-1B细胞的生长抑制率，随作用时间的延长和剂量的增加而增加，SKOV3细胞的生长抑制率从（5.03±0.08）％增加至（53.24±1.22）％，HEC-1B细胞的生长抑制率从（5.13±0.37）％增加至（56.16±1.08）％。相同剂量的重组杆状病毒感染的St9细胞裂解液，作用相同时间，其对HEC-1B细胞的生长抑制率高于SKOV3细胞，差异有统计学意义（P〈0.01）。经重组杆状病毒感染的St9细胞裂解液作用后，镜下可见癌细胞出现明显改变甚至成片坏死崩解为无定形的颗粒状物质。结论CB-LHRH’蛋白可有效杀伤LHRH受体阳性的HEC-1B细胞，有望成为治疗表达LHRH受体的肿瘤的抗肿瘤靶向药物。
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