作者：李光乾 王海萍 蒋春明发作热休克蛋白质类半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12细胞凋亡依达拉奉
摘要：目的 观察幼年大鼠惊厥持续状态（status convulsion,SC）后脑组织海马中内质网分子伴侣葡萄糖调节蛋白78（glucose regulated protein,GRP78）、半胱氨酸门冬氨酸特异性蛋白酶12（Caspase-12）的表达及神经细胞凋亡的变化,并探讨依达拉奉（edaravone,ED）对三者的影响.方法 将195只SD幼年雄性大鼠随机分为生理盐水对照组（NS组）、惊厥持续状态组（SC组）和依达拉奉预处理组（ED组）,每组65只,各组均按SC后处死时间点分为4、12、24、48、72 h五个亚组,每组13只.采用氯化锂-匹鲁卡品化学点燃法制备幼年大鼠SC模型.应用逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）法检测GRP78 mRNA和Caspase-12 mRNA的表达,免疫组化法检测大鼠海马中GRP78和Caspase-12 蛋白表达情况,TUNEL法检测神经细胞凋亡数的变化.结果 （1）免疫组化结果显示SC组幼年大鼠海马中GRP78（12 h组0.1480±0.0164,24 h组0.1682±0.0114,48 h组0.1540±0.0102）和Caspase-12（12 h组0.1325±0.0165,24 h组0.1794±0.0213,48 h组0.1525±0.0423,72 h组0.1309±0.0199）表达增强,与NS组（GRP78：12 h组0.1214±0.0147,24 h组0.1272±0.0177,48 h组0.1260±0.0157;Caspase-12：12 h组0.1050±0.0121,24 h组0.1041±0.0151,48 h组0.1058±0.0222,72 h组0.1036±0.0186）比较差异有统计学意义（P＜0.01或＜0.05）;与SC组比较,ED组GRP78（12 h组0.1550±0.0131,24 h组0.1886±0.0154,48 h组0.1721±0.0151）表达明显增强,而Caspase-12（12 h组0.1211±0.0184,24 h组0.1545±0.0205,72 h组0.1085±0.0219）表达明显降低,差异均有统计学意义（P＜0.01或P＜0.05）;（2）RT-PCR法检测结果显示GRP78 mRNA和Caspase-12 mRNA表达趋势与蛋白基本相似;（3）SC组在惊厥12 h（11.41±2.37）时间点海马CA1区TUNEL阳性细胞数已显著高于NS组（P＜0.01）,48 h（28.78±5.11）达峰,而ED组TUNEL阳性细胞数在12～72 h时间点（12 h组8.98±2.22,24 h组13.09±2.54,48 h组20.57±4.89）均较SC组显著下降（P＜0.01或P＜0.05）,但仍高
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