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刺五加皂甙诱导PC12细胞对缺血的耐受及相关机制探讨

作者:陈建; 朱俐; 潘永进刺五加甙pc12细胞缺血核蛋白质类dna结合蛋白质类

摘要:目的研究刺五加皂甙(ASE)预处理诱导PC12细胞对缺血的耐受及相关机制。方法采用MTT比色分析、细胞形态学观察、Westem Blot法以及凝胶电泳迁移实验(EMSA)等方法比较ASE预处理对PC12细胞缺血模型(氧葡萄糖剥夺模型)的影响。结果在PCI2细胞缺血模型中,9h氧葡萄糖剥夺可明显降低PC12细胞活力,细胞存活率为(49.12±3.22)%。然而ASE24h预处理则显著抑制9h氧葡萄糖剥夺对细胞的损伤,细胞存活率显著提高(67.97±2.92)%,实验组与对照组间相比较差异有显著统计学意义(F=473.67,P〈0.01);细胞形态学显示,刺五加皂甙(终浓度50μg/ml)预处理再缺血处理9h,可明显减轻缺血9h所致的细胞损害,较多细胞保留突起,突起网络依然存在,胞体完好。Western Blot结果表明ASE预处理能明显增加缺氧诱导因子-1α(HIF-1α蛋白)表达,差异有显著统计学意义(F=167.18,P〈0.01);ASE预处理诱导表达的HIF-1具有生物学活性,它能与DNA结合,并激活下游基因促红细胞生成素(EPO蛋白)的表达,差异亦有显著统计学意义(F=128.37,P〈0.01)。结论ASE预处理可以诱导PC12细胞对缺血的耐受,其诱导耐受的作用可能与ASE预处理诱导PCI2细胞HIF—let稳定表达、提高HIF-1与DNA结合活性以及增加其下游基因EPO蛋白表达有关。

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