作者：温贤浩; 徐酉华survivin反义寡核苷酸细胞诱导分化细胞表面分化抗原survivin蛋白过氧化物酶染色白血病细胞k562反义寡核苷酸技术免疫组织化学方法k562细胞流式细胞仪检测硝基四氮唑蓝平均荧光强度蛋白表达水平超微结构cd33
摘要：目的采用反义寡核苷酸技术研究survivin与白血病细胞K562分化的关系.方法实验分为反义寡核苷酸组、无义寡核苷酸组、脂质体组、空白对照组,转染后48 h观察细胞形态及超微结构的变化;转染后24、48 h分别进行联苯胺染色、过氧化物酶染色及硝基四氮唑蓝(NBT)还原实验检测细胞功能;流式细胞仪检测细胞表面分化抗原CD33的表达;免疫组织化学方法检测survivin蛋白水平.结果反义寡核苷酸作用后,K562细胞出现向成熟红系及粒系分化的形态学及超微结构的改变,联苯胺染色阳性率、过氧化物酶染色阳性率、NBT还原实验阳性率均高于无义寡核苷酸组、脂质体组及空白对照组(P＜0.01);细胞表面分化抗原CD33的平均荧光强度在反义寡核苷酸组降低(P＜0.01);反义寡核苷酸作用24 h后细胞内survivin蛋白的表达水平低于空白对照组(P＜0.05),但与无义寡核苷酸组、脂质体组比较差异无统计学意义(P＞0.05),而48 h后survivin蛋白表达水平进一步降低,与其他各组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 survivin反义寡核苷酸能诱导K562细胞向成熟红系及粒系方向分化.
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