嗅神经切断对小鼠嗅感觉神经元的影响

作者：羡慕; 魏永祥; 韩德民; 范尔钟; 刘仲燕; ...嗅觉受体神经元模型动物脱噬作用c57小鼠神经切断术嗅感觉神经元tunel阳性细胞receptormrna水平嗅标记蛋白

摘要：目的分析嗅神经切断对小鼠嗅感觉神经元(olfactory receptor neurons, ORN)凋亡情况的影响,并探讨这一造模方法的可靠性.方法取2月龄C57小鼠33只,随机分组后,实验组小鼠行嗅神经切断术,通过辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)顺行神经示踪验证造模成功与否.以脱氧核苷酸转移酶介导的生物素dUTP缺口末端标记技术(TdT mediated deoxyuridine triphosphate-biotin nick end labelling, TUNEL)观察术后8 h、2 d、3 d和5 d嗅上皮中ORN的凋亡情况,同时在蛋白和mRNA水平观察成熟ORN的特异性标记蛋白--嗅标记蛋白(olfactory marker protein, OMP)在嗅上皮中的表达情况.结果嗅神经切断术后嗅球中无HRP标记.TUNEL和OMP 阳性反应发生于ORN,嗅神经切断术后TUNEL阳性细胞数显著增多,并于术后第2天达到高峰,与此同时OMP mRNA的表达水平开始显著下降,并在术后第5天降至更低,嗅上皮的厚度也相应变薄.结论本实验所采取的造模方法可以较可靠地切断小鼠的嗅神经,并造成小鼠嗅上皮中ORN的同步凋亡.

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