作者：王兴华levovist骨骼肌细胞gfp超声造影剂小鼠实验研究质粒介导基因表达水平微泡造影剂流式细胞仪细胞生存率台盼蓝染色显微镜测定基因转染目的基因成肌细胞照射时间肌纤维数he染色细胞显示动物实验损伤面积
摘要：目的探讨空气型微泡造影剂Levovist介导基因转染小鼠骨骼肌细胞的作用.方法采用质粒GFP作为目的基因,超声(1MHz脉冲波,20%工作周期,空间时间峰值强度1 W/cm2)结合Levovist作用于小鼠H2K成肌细胞,照射时间分别为 10 s、20 s、30 s、40 s、50 s、60 s,流式细胞仪测定GFP阳性细胞率,台盼蓝染色测定细胞生存率.超声结合Levovist作用于小鼠胫前肌,1周后处死小鼠,荧光显微镜测定GFP阳性肌纤维数,HE染色估计肌肉破坏面积.结果超声单独作用于H2K细胞显示出较佳的增强GFP基因表达的作用,加入微泡造影剂Levovist后,细胞死亡率显著增加,GFP基因表达水平降低;动物实验显示,Levovist结合或不结合超声均无增强GFP基因表达水平作用,但会增加肌肉损伤面积. 结论本实验条件下,Levovist无增强骨骼肌细胞基因表达作用,却加重细胞损伤.
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