作者：周忠江; 侯玉清; 赖文岩; 李利; 吴平生; ...促血管新生超声介导靶向传输基因微泡vegf165基因实验研究人血管内皮生长因子心肌血管新生pcdna3真核表达质粒分子生物学方法大鼠心肌mrna表达蛋白印迹杂交
摘要：目的探讨超声介导微泡靶向传输血管内皮生长因子VEGF165促心肌血管新生即心肌"分子搭桥"的新途径.方法利用分子生物学方法构建人血管内皮生长因子真核表达质粒pcDNA 3.1-/VEGF165;制备载VEGF165基因脂质体微泡,分析其理化性质和功能,在超声场利用超声辐射向大鼠梗死心肌靶向传输VEGF165;2周后取材,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)评价大鼠心肌中人源VEGF165 mRNA表达,蛋白印迹杂交(Western Blot)观察大鼠心肌VEGF165的蛋白表达,CD34免疫组化微血管密度(MVD)计数半定量法评价超声介导微泡靶向传输VEGF165促梗死心肌血管新生效果.结果①成功构建、克隆血管内皮生长基因VEGF165重组真核表达质粒pcDNA 3.1-/VEGF165,测序分析、酶切鉴定准确无误;②研制的脂质体微泡超微结构显示可粘附或包载DNA,粒度分析显示平均粒径＜5 μm;③在超声介导下该脂质体载基因微泡可靶向传输VEGF165至大鼠梗死心肌,超声介导靶向传输组VEGF165的mRNA、蛋白表达及促血管新生作用(MVD表示)仅次于VEGF165基因心肌注射组.结论超声介导微泡可向大鼠心肌靶向传输VEGF165基因并产生促血管新生效应.
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