作者：郭风劲; 成军; 刘妍; 纪冬; 张黎颖; 王琳...肝炎病毒一氧化氮合酶病毒核心蛋白质类转录遗传
摘要：目的 探讨丙型肝炎病毒（HCV）核心（core）蛋白对诱导型一氧化氮合酶（iNOS）基因启动子转录的激活作用。方法 利用生物信息学技术确定iNOS基因的启动子区域（iNOSp），聚合酶链反应（PCR）扩增iNOSp的DNA，克隆至真核报告载体pCAT3-Basic中，构建pCAT3-iNOSp报告载体；以该质粒转染正常人肝细胞LO2，用酶联免疫吸附法（ELISA）检测氯霉素乙酰转移酶（CAT）的表达活性；并与HCV核心蛋白的真核表达载体pcDNA3．1（-）-core共转染LO2细胞，用ELISA法检测CAT的表达活性。结果 成功获得iNOS基因启动子的正确克隆，pCAT3-iNOSp和pcDNA3．1（-）core瞬时共转染LO2细胞时，报告基因表达载体中的SV40病毒的即刻早期启动子的转录活性明显提高，CAT表达活性是pCAT3-Basic空载体的11倍，是pCAT3-iNOSp的6倍，重复试验得到了相似的结果。结论 成功克隆的iNOS启动子有转录活性；HCV核心蛋白具有对iNOS基因启动子的反式激活作用。HCV核心蛋白在细胞内的表达对于iNOS基因反式激活在HCV感染相关的慢性肝脏疾病的发病过程中具有重要意义。
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