作者:王勇; 吴海玮; 张兆松; 胡雪梅; 刘丰; 李...特异性ige抗体表位噬菌体日本血吸虫免疫学鉴定体克血清重复目的结论
摘要:目的从噬菌体表面显示肽库筛选并鉴定日本血吸虫特异性IgE抗体相关表位.方法用ABC-酶联免疫吸附(ELISA)法检测日本血吸虫病流行区居民血清150份,选择其中15份具高滴度血吸虫特异性IgE抗体的血清,混合后经蛋白G柱亲和层析祛除IgG抗体,用于对12肽的噬菌体表面显示肽库进行5轮免疫亲和淘筛.从所获噬菌体克隆中挑取35个克隆,经DNA序列测定,对各独立肽表位进行免疫学鉴定.结果经5轮筛选,DNA序列测定显示共有4个独立噬菌体克隆,其中phage 3和phage 6有较多重复克隆存在,为优势克隆;Western blot分析显示,筛库血清中特异性IgE抗体能有效识别各噬菌体克隆.分别用各克隆噬菌体免疫小鼠,均能诱导特异性IgE抗体产生.结论从12肽噬菌体表面显示肽库中成功筛选到日本血吸虫特异性IgE抗体相关肽表位.
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