作者：宋银宏; 张昌菊宫颈肿瘤dna甲基化基因apc肼苯哒嗪
摘要：目的观察宫颈癌细胞株HeLa、CaSki和SiHa中APC基因的表达及其与甲基化修饰之间的相关性，探讨肼苯哒嗪对APC基因的去甲基化作用及其对细胞生长和凋亡的影响。方法应用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）及逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）、荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）分析肼苯哒嗪处理前后宫颈癌细胞株APC基因的甲基化状态及表达情况；采用免疫组织化学SP法检测肼苯哒嗪对宫颈癌细胞株APC相关蛋白β-连环蛋白表达的影响；四甲基偶氮唑蓝（MTT）法及流式细胞术观察肼苯哒嗪对宫颈癌细胞增殖及凋亡的影响。结果（1）HeLa及CaSki细胞APC基因分别为甲基化及半甲基化，SiHa细胞APC基因无甲基化。（2）40μmol／L肼苯哒嗪处理72h后，HeLa、CaSki和SiHa细胞的生长抑制率分别为（52．12．4-3．78）％、（44．31．4-2．59）％、（47．73．4-4．73）％，正常细胞人脐静脉内皮细胞（HECV）表现为耐药；HeLa和CaSki细胞中APC基因呈去甲基化状态且APCmRNA均呈阳性表达；HeLa、CaSki和SiHa三种细胞中APCmRNA表达分别比处理前增加10．35、11．40及0．73倍。（3）40μmol／L肼苯哒嗪作用HeLa、CaSki细胞72h后，可将细胞阻滞于S期和G2-M期并诱导细胞凋亡；β-连环蛋白在细胞膜上有明显的表达。结论APC甲基化修饰是宫颈癌发生重要机制之一，肼苯哒嗪能使甲基化的APC基因去除甲基化修饰重新表达，且能抑制宫颈癌细胞生长。
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