作者：戴纪刚; 闵家新; 张国强; 魏泓; 肖颖彬肿瘤细胞系小鼠肿瘤线粒体dna突变非编码区lewis肺癌mtdna突变nd1酶切位点核酸序列
摘要：目的探讨线粒体DNA(mtDNA)突变与肿瘤发生发展的关系.方法采用聚合酶链反应(PCR)技术结合限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)和单链构象多态性分析(PCR-SSCP)技术了解Lewis肺癌、LA795、Hca-F、Hca-P、CT26、SCC891共6个小鼠肿瘤细胞系mtDNA的基因变异.结果经PCR-RFLP分析发现,这些肿瘤细胞系mtDNA编码区的tRNAIle+Glu+Met及ND1基因核酸序列,在27个限制性内切酶酶切位点上均无差异.而在非编码区(D-loop),与对照小鼠相比,Hca-F出现了 Hinf I的新酶切位点; 用PCR-SSCP分析方法对这些肿瘤细胞系mtDNA的D-loop的5′及3′端作进一步分析,在6个肿瘤细胞系中,有4个在mtDNA非编码区上存在着突变.结论 D-loop是肿瘤细胞mtDNA突变的高发区,mtDNA突变在肿瘤的发生发展中可能起作用.
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