雌激素受体α抑制剂MPP在小鼠囊胚形成和滋养层干细胞中影响YAP核定位

作者：许颂华; 朱灵华; 刘玥; 王晓江; 钟玉环; ...桑葚胚滋养层干细胞yap

摘要：目的研究雌激素受体α(estrogen receptor α,ERα)抑制剂甲基-哌啶-吡唑(methyl-piperidino-pyrazole,MPP)在小鼠桑葚胚和滋养层干细胞(trophoblast stem cells,TSCs)中对YAP 的影响。方法收集昆明(kunming,KM)小鼠8-细胞胚,置于0μmol/L(对照组)和5μmol/L(实验组)MPP 中培养,分别于8h、12h 和24h 后收集各组桑葚胚,采用免疫荧光技术观察YAP 表达,采用Real Time-PCR 检测MPP 处理24h 后Yap mRNA 表达变化;将小鼠TSCs 置于0μmol/L、2.5μmol/L、5μmol/L 和10μmol/L MPP 中培养,48h 后观察细胞形态改变,分别检测Sox2、YAP、Cdx2 mRNA 和蛋白表达水平。结果小鼠8-细胞胚经MPP 处理24h 后,桑葚胚YAP 蛋白核定位水平降低,Yap mRNA 水平无显著改变;经MPP处理48h 后,5μmol/L 组小鼠TSCs 细胞出现细胞团块,10μmol/L 组细胞增殖明显受抑制;与对照组相比,5μmol/L 组细胞Sox2 mRNA 表达水平升高,Yap 和Cdx2 mRNA 水平无显著改变,团块状细胞中的YAP 蛋白失去明显的核内定位,SOX2 和CDX2 阳性细胞的表达更加密集。结论 ERα在小鼠桑葚胚和TSCs 中调控YAP 核定位,其在TSCs 细胞中的作用与CDX2和SOX2 的表达有关。

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