作者：刘通; 于佳妮; 陈玉佩; 陈欢; 邹德辉; 晏...单根肌纤维多裂肌肌卫星细胞分离培养鉴定pax7myoddesmin损伤修复国家自然科学基金卫星细胞骨骼肌肌肉纤维骨骼细胞分离组织工程
摘要：背景:多裂肌的损伤、萎缩是临床各种腰背痛及功能障碍的主要来源之一,肌卫星细胞是肌肉干细胞,对肌肉的损伤修复起至关重要的作用。但目前尚缺少有关多裂肌卫星细胞分离培养方面的研究。目的:采用单根肌纤维法分离大鼠多裂肌卫星细胞并进行鉴定。方法:在体分离大鼠多裂肌,采用单根肌纤维法获得多裂肌卫星细胞,经反复差速贴壁法纯化,观察其形态变化并绘制细胞增殖曲线;以分化培养基进行诱导,观察其成肌分化情况;并采用免疫荧光法鉴定多裂肌卫星细胞标志蛋白Pax7、Myod、Desmin的表达。结果与结论:①单根多裂肌纤维经培养72 h后,可见肌纤维周围有大量长梭形或纺锤形细胞贴壁;②采用差速贴壁法纯化后,可见原代细胞呈圆形,高折光性,重新接种后24-48 h可贴壁,其生长呈“S”型;③以分化培养基诱导可出现较大肌管;④免疫荧光鉴定可见Pax7、Myod在肌卫星细胞的细胞核中为阳性反应,Desmin在细胞质中为阳性反应;⑤结果表明,单根肌纤维法可成功分离大鼠多裂肌卫星细胞,可用于未来多裂肌再生修复方面的研究。
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