作者：杨晓明; 赵泉来; 高智; 徐宏光; 王弘; 刘...组织构建终板软骨器官培养动物模型椎间盘循环压力软骨细胞细胞基质细胞退变
摘要：背景：椎间盘终板软骨在一定的循环压力作用下会发生形态学的退变，重要的细胞外基质降低，而同时Wnt-5a基因的表达随着加力时间的延长逐渐降低，Wnt-5a基因与椎间盘退变存在某种重要的内在联系。目的：检测循环压力诱导下Wnt-5a基因在兔椎间盘退变器官模型中的表达变化，探讨其与椎间盘退变之间的关系。方法：选取6月龄新西兰大白兔，取出腰椎间盘制备椎间盘退变器官模型，随机分为加力组和对照组，对照组不加力。利用苏木精-伊红染色及番红O固绿染色观察2组大体组织变化；运用Real time PCR法检测各组软骨中Wnt-5a、Ⅱ型胶原以及蛋白多糖基因的表达，Western-blotting检测Wnt-5a蛋白在各组中表达量的变化。结果与结论：①对照组及加力组椎间盘器官培养至第7天，其组织形态学在一定程度上发生改变，大体结构完整，Wnt-5a、Ⅱ型胶原以及蛋白多糖等基因的表达与0 d对照组相比呈现出差异化，14 d加力组以及对照组较0 d组在组织形态学上差异更加明显；②7 d加力组、14 d加力组及对照组中的Wnt-5a、Ⅱ型胶原以及蛋白多糖等基因表达下降，Wnt-5a蛋白的表达变化趋势与基因水平检测结果一致，但加力组较未加力各组基因表达降低更加显著，加力组中随加压时间的延长各组基因表达进行性降低；③结果提示，通过调节Wnt-5a基因的表达，可能会影响终板软骨细胞的退变进程，进而为椎间盘退变的防治提供新思路。
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