作者：陈后煌; 邵翔; 李俐; 吴明霞; 李西海软骨细胞凋亡模型炎症组织工程组织构建mttdapi国家自然科学基金
摘要：背景：肿瘤坏死因子α是诱导骨关节炎软骨细胞凋亡的主要细胞因子,对骨关节炎的病理进程具有重要调节作用。目的：比较不同质量浓度肿瘤坏死因子α诱导大鼠软骨细胞凋亡模型,为进一步探讨药物对软骨细胞凋亡的调控作用提供理论支持。方法：清洁级4周龄SD大鼠,采用机械-Ⅱ型胶原酶消化法获取膝关节软骨细胞,并用不同质量浓度的肿瘤坏死因子α（0,10,20,30,40μg/L）诱导建立软骨细胞的凋亡模型,倒置相差显微镜观察软骨细胞的形态结构,Ⅱ型胶原免疫组化鉴定软骨细胞,MTT检测软骨细胞的活性,DAPI检测软骨细胞的凋亡情况。结果与结论：①体外培养软骨细胞,Ⅱ型胶原免疫组化染色可见胞浆呈棕黄色,为阳性细胞;②软骨细胞凋亡率,干预48 h肿瘤坏死因子α10,20,30μg/L明显高于0μg/L（P〈0.01）,肿瘤坏死因子α40μg/L明显高于10μg/L（P〈0.01）;③软骨细胞活性,干预48 h肿瘤坏死因子α10,20,40μg/L明显低于0μg/L（P〈0.01）,肿瘤坏死因子α20μg/L明显低于10μg/L（P〈0.05）,肿瘤坏死因子α40μg/L明显低于10μg/L（P〈0.01）、20μg/L（P〈0.05）。④结果说明,20μg/L肿瘤坏死因子α能成功建立炎症介导软骨细胞凋亡模型。
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