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不同培养方法对人脐带间充质干细胞的影响

作者:刘奉; 蒋祥林; 刘明明组织工程脐带干细胞脐带脐血干细胞培养方法脐带间充质干细胞剖宫产组织贴块法胰酶消化法培养瓶造血干细胞

摘要:背景:脐带干细胞培养主要来源于足月儿,常用培养方法包括组织贴块法、胰酶消化法,但是对于不同培养方法对脐带间充质干细胞的分离结果尚存在较大的争议。目的:观察不同培养方法对脐带间充质干细胞的影响。方法:取30例足月妊娠剖宫产健康胎儿脐带,采用组织贴壁法和胶原酶-胰酶消化法进行培养,制备细胞悬液,获得人脐带间充质干细胞进行分离培养,在流式细胞仪上测定细胞生长情况。结果与结论:(1)细胞融合情况:脐带经过组织贴壁法原代培养5 d后,细胞开始从脐带组织分离,呈现梭形,培养10 d后细胞融合达到80%,脐带经胶原酶-胰酶消化法培养5 d后,可见少量形态各异的贴壁细胞分布,纤维样细胞培养2周后培养融合才达到80%;(2)细胞生长情况:两种不同培养方法分离出的脐带间充质干细胞生长情况差异无显著性意义(P〉0.05);(3)细胞鉴定结果:两种培养方法培养的细胞CD13,CD29,CD44及CD105标志物表达均为阳性。(4)结果说明:人脐带间充质干细胞采用组织贴壁原代培养法培养成功率高,优于胶原酶-胰酶消化法培养。

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中国组织工程研究

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