作者：苏丽萍 刘小山 王雪梅 陈晓 张丽萍 蒲红...组织构建组织工程二乙酰吗啡小脑颗粒神经元凋亡hslejnk国家自然科学基金
摘要：背景：半胱-天冬氨酸蛋白酶8（Caspase-8）是细胞凋亡过程起始的重要因子,二乙酰吗啡可致神经元细胞凋亡,其与二乙酰吗啡致小脑颗粒神经元细胞凋亡之间关系尚未见报道。目的：验证二乙酰吗啡诱导小脑颗粒神经元细胞凋亡与caspase-8基因表达情况,明确caspase-8参与二乙酰吗啡致神经元凋亡过程。方法：取出生7 d SD大鼠小脑颗粒神经元细胞进行体外培养,第7天后,以不同质量浓度的二乙酰吗啡（10,40,80,100,120 mg/L）和C-jun氨基末端激酶通路特异性抑制剂SP600125作用小脑颗粒神经元细胞24 h,并分对照组（0 mg/L二乙酰吗啡）,80 mg/L二乙酰吗啡组,二乙酰吗啡＋SP 600125组;采用Hoechst 33258荧光染色观察细胞形态学改变,流式细胞仪测细胞凋亡率,免疫荧光、RT-PCR及Western Blotting检测caspase-8 mRNA和蛋白表达情况。结果与结论：①施加不同质量浓度二乙酰吗啡致神经元细胞凋亡,凋亡细胞出现透亮深蓝色的凋亡小体,细胞核呈现固缩、凝聚及断裂,随给药浓度增加细胞凋亡率呈现升高趋势（P〈0.05）。②与对照组相比,在80 mg/L二乙酰吗啡干预时caspase-8 mRNA和蛋白表达明显明显表达（P〈0.05）;caspase-8 mRNA随给药浓度增加呈现升高趋势（P〈0.05）,二乙酰吗啡＋SP600125组中caspase-8 mRNA和蛋白较80 mg/L二乙酰吗啡组明显下调（P〈0.05）。结果提示caspase-8参与二乙酰吗啡致小脑颗粒神经元细胞凋亡过程,同时也是C-jun氨基末端激酶信号通路中的重要候选促凋亡因子。
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