作者：冯璋; 张芮; 冯永强; 周一冲; 王一兵组织构建组织构建与生物活性因子神经生长因子低亲和力受体sortilin瘢痕疙瘩成纤维细胞正常皮肤成纤维细胞hacat实时定量pcrwesternblot国家自然科学基金
摘要：背景：既往研究发现神经生长因子在创面愈合过程中发挥重要作用，但对于成纤维细胞中神经生长因子低亲和力受体p75及sortilin的研究较少，p75及sortilin在瘢痕组织成纤维细胞及正常皮肤组织成纤维细胞中的表达量是否有差异目前未见报道。目的：比较神经生长因子低亲和力受体p75及soritilin在瘢痕疙瘩成纤维细胞及正常皮肤成纤维细胞的中表达的差异。方法：体外培养瘢痕疙瘩成纤维细胞及正常皮肤成纤维细胞，并以人永生化上皮细胞HaCaT为阳性对照。通过实时定量PCR在mRNA水平检测p75及sortilin在瘢痕疙瘩成纤维细胞及正常皮肤成纤维细胞的表达及差异，进一步通过Western-blot及细胞免疫化学方法观察p75神经营养因子受体及sortilin在蛋白水平的表达及差异。结果与结论：实时定量PCR及Westernblot结果可见，在mRNA及蛋白水平瘢痕疙瘩成纤维细胞及正常皮肤成纤维细胞中p75，sortilin均呈阳性表达，其中瘢痕疙瘩成纤维细胞及正常皮肤成纤维细胞中p75及sortilin在mRNA及蛋白水平表达量明显少于HaCaT，且p75在瘢痕疙瘩成纤维细胞及正常皮肤成纤维细胞中表达差异无显著性意义，sortilin表达量在瘢痕疙瘩成纤维细胞中明显低于正常皮肤成纤维细胞（P〈0．05）。免疫细胞化学结果显示p75及sortilin在瘢痕疙瘩成纤维细胞及正常皮肤成纤维细胞中的表达部位均位于胞膜及胞浆。由于神经生长因子前体与p75受体高亲和力结合并在sortilin协助下发挥促进细胞凋亡的作用，sortilin在瘢痕成纤维细胞的表达明显低于正常皮肤成纤维细胞，可能与其高增殖状态有关，该结果为病理性瘢痕的防治提供了新的靶点。
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