作者：尹承慧; 邱俊钦; 曾昭勋; 陈宗雄干细胞骨髓干细胞腺病毒载体人骨形态发生蛋白2骨髓间充质干细胞基因转染大鼠碱性磷酸酶mtt法基因工程技术种子细胞骨缺损省级基金干细胞图片文章
摘要：背景：骨髓间充质干细胞作为骨、软骨创伤缺损及退变修复的种子细胞越来越受到关注。目的：分析人骨形态发生蛋白2基因转染对白色封闭群大鼠（SD大鼠）骨髓间充质干细胞的影响。方法：分离纯化SD大鼠骨髓间充质干细胞并体外扩增，通过腺病毒载体介导人骨形态发生蛋白2基因转染骨髓间充质干细胞，分别通过荧光显微镜观察荧光表达情况及蛋白质水平来测定转染后人骨形态发生蛋白2的表达，碱性磷酸酶定量测定鉴定成骨活性及MTT法评估人骨形态发生蛋白2转染对骨髓间充质干细胞的影响。结果与结论：从SD大鼠骨髓提取物中分离培养的细胞形态为梭形，呈铺路石状、漩涡状生长，经流式细胞仪检测及多项分化能力鉴定符合骨髓间充质干细胞的特征；经转染人骨形态发生蛋白2基因后，骨髓间充质干细胞表达人骨形态发生蛋白2、碱性磷酸酶；MTT法检测转染人骨形态发生蛋白2基因后，骨髓间充质干细胞增殖能力明显增强（P〈0．05）。说明人骨形态发生蛋白2基因转染骨髓间充质干细胞后可以持续、高效表达入骨形态发生蛋白2和碱性磷酸酶，在体外明显促进骨髓间充质干细胞的增殖。
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