作者：张树威; 金伟; 祝少博; 成昊; 金林; 陶圣...干细胞干细胞培养与分化甲状旁腺相关蛋白印第安刺猬蛋白骨骺干细胞增殖分化增殖细胞核抗原其他基金干细胞图片文章
摘要：背景：甲状旁腺素相关蛋白-印第安刺猬蛋白两者相互作用调节着骨骺区软骨的分化成熟及增殖,促使骨骺区细胞处于一种相对稳定的状态。目的：分析甲状旁腺相关蛋白亚基因PTHrP（1-36）、PTHrP（38-94）和PTHrP（107-139）对骨骺干细胞的调控作用以及PTHrP（107-139）与其他调控因子的影响。方法：用脂质体介导的基因转染技术将质粒pTRE-PTHrP（1-36）、pTRE-PTHrP（38-94）和pTRE-PTHrP（107-139）分别转染pTet-on骨骺干细胞株,放入诱导分化培养基中进行培养,加入1mg/L的强力霉素进行诱导,以RT-PCR的方法检测增殖细胞核抗原基因的表达变化。再次将质粒pTRE-PTHrP（107-139）转染pTet-on骨骺干细胞株,加入不同浓度的强力霉素进行诱导,应用RT-PCR的方法检测Ⅱ型胶原、X型胶原、印第安刺猬蛋白、Ptc、Sox9、骨形态发生蛋白6基因的表达变化。结果与结论：强力霉素诱导的质粒pTRE-PTHrP（107-139）转染组的增殖细胞核抗原表达明显高于质粒pTRE-PTHrP（1-36）转染组和质粒pTRE-PTHrP（38-94）转染组;在强力霉素诱导的质粒pTRE-PTHrP（107-139）转染组中Ⅱ型胶原、Sox-9表达明显增强,Ihh表达未见明显变化,而Ptc、X型胶原、骨形态发生蛋白6表达明显降低。而且其表达量与强力霉素存在剂量依赖性。提示PTHrP（107-139）可能是通过调控Sox-9、Ptc、骨形态发生蛋白6的表达来促进骨骺干细胞增殖并抑制其分化的,而PTHrP（1-36）、PTHrP（38-94）对前癌干细胞的增殖并无明显作用。pTet-on质粒系统在前癌干细胞能有效的调控外来基因的表达。
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