作者：周鑫; 张红; 李宁; 王燕玲; 谢漪聚合酶链式反应碳离子hela细胞线粒体dna4977bp缺失
摘要：背景：线粒体DNA 4 977 bp缺失的累积对衰老的多细胞动物来说是一个显著的特征，同时也与各种肿瘤细胞的转移和凋亡有关。目前的研究已证明辐射可特异性地诱导此缺失的产生，有望将其作为新的DNA水平的辐射损伤生物剂量标记。 目的：用聚合酶链反应方法检测碳离子辐射引起的Hela细胞线粒体DNA 4 977 bp突变缺失，并观察碳离子辐射剂量及辐射时间与线粒体DNA 4 977 bp缺失的相关性。 设计、时间及地点：细胞DNA水平的对照实验，于2008—10／11在甘肃省兰州市近代物理研究所完成。 材料：人宫颈癌细胞Hela细胞株。 方法：Hela细胞经2-8Gy的碳离子辐射后，于2—24h各个时间点分别提取包含线粒体DNA的全基因组DNA，并用聚合酶链反应法扩增线粒体DNA 4 977 bp缺失的特异片段，通过限制反应模板浓度和聚合酶链反应循环数的方法进行定性分析。 主要观察指标：碳离子辐射剂量及辐射时间对线粒体DNA 4 977 bp缺失的影响。 结果：经2Gy辐照处理的Hela细胞在2，4，8，24h4个时间点的检测中均无聚合酶链反应阳性产物，8Gy辐照处理的Hela细胞在12，16，24h3个时间点可检测到线粒体DNA 4 977 bp缺失，且随时间延长而累积。辐照后12h Hela细胞在8 Gy辐照处理后可检测到线粒体DNA 4 977 bp缺失，辐照后16和24h Hela细胞在6，8 Gy辐照处理后可检测到线粒体DNA 4 977 bp缺失。 结论：碳离子辐射引起的Hela细胞线粒体DNA 4 977 bp缺失存在剂量相关性，且其累计程度可能与辐射时间有关。
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