作者：李萍; 张海燕; 刘国良; 盛志业; 马小峰; ...细胞增殖丝裂原激活蛋白激酶类肾小球膜
摘要：背景：p38丝氨酸蛋白激酶信号激活引起细胞生长、增殖、分化,可能是糖尿病血管并发症发生发展的共同通路。 目的：观察阿托伐他汀对抗p38丝氨酸蛋白激酶信号通路的激活,及其对氧化修饰低密度脂蛋白作用下人肾小球系膜细胞增殖与转化生长因子β1表达的干预。 设计：随机、平行对照、开放性实验。 单位：中国医科大学附属第一医院内分泌科,解放军沈阳军区总医院内分泌科、呼吸科及泌尿外科。 材料：实验于2004-05/2005-05先后在中国医科大学药理教研室、沈阳军区总医院呼吸科实验室完成。以肾肿瘤行单侧肾切除患者正常部分的肾皮质（由沈阳军区总医院泌尿外科向军主任提供,征得患者同意）作为实验用人肾小球系膜细胞的来源。氧化修饰低密度脂蛋白浓度为（5.3±1.0）nmol/100μg（购自协和医科大学生化研究所,批号20040711）;阿托伐他汀（辉瑞制药,批号45837088）;p38丝氨酸蛋白激酶单克隆抗体（Santa Cruz）。 方法：①取肾肿瘤行单侧肾切除患者的正常部分肾皮质6.0～8.0cm^3,分离制备肾小球系膜细胞,待生长单层达80%培养面积后进行消化传代。传至第2代时,观察细胞形态,行DAB染色,胞浆内出现棕黄色团块或泥沙样颗粒为DAB染色阳性。油红“O”染色检测细胞吞噬氧化修饰低密度脂蛋白的情况。取传至4～10代的细胞用于实验。②按5×103个细胞接种于96孔板,200μL/孔。实验共分5组：阿托伐他汀1.2,6,12mg/L浓度组分别加入对应浓度的阿托伐他汀溶液,氧化低密度脂蛋白组和空白对照组此时仅加入培养基,6个平行孔/组。各组预处理30min后,除空白对照组外均暴露于终浓度为80mg/L的氧化修饰低密度脂蛋白中,24h后每孔加入四甲基偶氮唑蓝,在492nm波长的酶标仪上检测吸光度值,计算细胞增殖抑制率。③将1×106～3×106细胞接种于6个200mL培养瓶中,随机数字
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
