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原代培养海马神经元周期素依赖性蛋白激酶5及其活性在低氧环境中的变化

作者:付剑亮; 邵福源; 宋莉莉细胞周期蛋白质依赖激酶类低氧海马

摘要:目的:观察低氧对原代培养海马神经元存活力、周期素依赖性蛋白激酶5蛋白表达及其活性变化的影响。 方法:实验于2005-01/12在解放军第二军医大学实验动物中心完成。取孕14~18dSD胎鼠的海马细胞进行原代培养,培养8~10d的细胞用于实验。取培养稳定阶段已分化成熟的大鼠海马神经元至低氧环境,继续培养12,24,36h,微孔酶标仪590nm处暗室内测定神经元存活力,免疫印迹测定周期素依赖性蛋白激酶5蛋白表达及其活性改变,每个时间点重复3次。 结果:与常氧组比较,低氧组从继续培养12h起神经元存活力明显下降[(1.01±0.14),(0.77±0.15);(0.98±0.12),(0.68±0.11);(0.95±0.11),(0.61±0.08);P〈0.01],周期素依赖性蛋白激酶5蛋白表达水平下降[(1.67±0.19),(0.82±0.08);(1.54±0.13),(0.75±0.06);(1.49±0.13),(0.70±0.11);P〈0.01],活性明显增加[(1.76,3.56);(1.84,4.29);(1.95,6.04);P〈0.01]。 结论:低氧环境可导致神经元损伤,与周期素依赖性蛋白激酶5过度激活有关。

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中国组织工程研究

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