作者：李新荣; 李艳平; 邓湘蕾; 王兰丹参酮血管平滑肌细胞丝裂原激活蛋白激酶类
摘要：目的：观察丹参酮ⅡA对高糖诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用，分析该作用与丝裂原活化蛋白激酶信号传导通路的关系。方法：实验于2004—01／2005—06在东南大学医学院发育与疾病相关基因实验室完成。①取大鼠胸主动脉，用组织贴壁法原代培养大鼠血管平滑肌细胞并传代，实验使用第4～8代细胞。②按实验分组干预细胞，正常对照组，培养液含5mmol／L葡萄糖；高糖组，培养液含30mmol／L葡萄糖；高糖对照组，培养液含30mmol／L葡萄糖±10g／L二甲亚砜；丹参酮ⅡA组，培养液含30mmol／L葡萄糖±0．5mg／L丹参酮ⅡA；U0126组，培养液含30mmol／L葡萄糖±25μmol／LU0126。③用二步法测定0．125，0．25，0，5，1．0，2．0，5．0，10．0mg／L丹参酮ⅡA对血管平滑肌细胞的毒性。④BrdU掺入DNA的EUSA法测定细胞内DNA合成水平。⑤同位素示踪法测定丝裂原活化蛋白激酶活性。结果：①高糖诱导的大鼠血管平滑肌细胞呈现快速增殖状态。②当丹参酮ⅡA剂量大于1，0mg／L时，有一定的细胞毒性。四甲基噻唑蓝法测定结果表明1．0，2．0，5．0，10．0mg／L丹参酮ⅡA组血管平滑肌细胞线粒体脱氢酶活性明显低于正常对照组（分别为0．654±0．023，0．580±0．032，0、465±0．041，0．376±0．053，0．840±0．085，P〈0．01），表明此浓度可造成细胞功能障碍，有明显的细胞毒性。③随着丹参酮ⅡA作用浓度的增加，细胞内BrdU掺入DNA的量逐渐下降，0．03125mg／L丹参酮ⅡA与高糖对照组相比差异有显著性意义（分别为0．958±0．086，1．059±0．047，P〈0．05），0．0625，0．125，0．25，0，5mg／L丹参酮ⅡA与高糖对照组相比差异有非常显著性意义（分别为0．865±0．058，0．781±0．099，0．738±0．071，0．616±0．028，1．059±0．047，P〈0．01）。④高糖组血管平滑肌细胞内丝裂原活化蛋白激酶的活�
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