作者：白金柱; 刘忠军; 徐光辉; 丁为民; 沈丽; ...细胞移植脊髓受体多巴胺d2
摘要：目的：检测人神经前体细胞多巴胺D2受体在体外和移植入脊髓后的表达。 方法：实验于2003-09／2005-01在北京大学干细胞研究中心完成。培养人神经前体细胞系hNPC-TERT细胞，进行反转录-聚合酶链反应、放射性配基结合实验。选择健康成年雌性新西兰兔10只，随机分为移植hNPC-TERT细胞组和移植Hela细胞组，各5只。采用免疫荧光染色检测hNPC-TERT多巴胺耽受体在体外和移植于兔正常脊髓后的表达。 结果：纳入动物10只，均进入结果分析。①反转录-聚合酶链反应：体外培养hNPC-TERT细胞表达耽受体mRNA，而Hela细胞不表达D2受体mRNA。②放射性配基结合分析：Raclopride与hNPC-TERT细胞D2受体结合的平衡解离常数为（1．52±0．16）nmol／L，最大结合位点为（80346±4306）个／细胞，D2受体在hNPC-TERT细胞的浓度为（13．34±0．34）pmol／L。③免疫荧光染色：D2受体在体外培养的hNPC-TERT细胞免疫荧光染色显示有D2受体蛋白表达，而Hela细胞无耽受体蛋白表达。D2受体在脊髓内移植hNPC-TERT细胞免疫荧光染色显示，移植后2d，hNPC-TERT细胞移植组可见人特异核和D2受体双标阳性染色细胞，表明脊髓内移植的hNPC-TERT细胞表达耽受体，低倍荧光显微镜下观察人特异核抗原染色分布，移植部位hNPC-TERT细胞（人特异核染色阳性细胞）未见明显迁移。Hela细胞移植组，人特异核抗原染色阳性细胞D2受体染色阴性，表明脊髓内移植的Hela细胞不表达D2受体。 结论：体外培养和脊髓内移植2d的hNPC-TERT表达队受体。D2受体是核素显像示踪脊髓内移植hNPC-TERT细胞可能的候选靶点，而放射性标记的Raclopride是可选择的示踪剂。
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