作者：吴燕峰; 程志安; 沈慧勇; 罗懿明; 李庆明成骨细胞续断雌激素类含药血清成骨细胞增殖细胞毒性检测
摘要：目的：观察不同浓度续断含药血清的细胞毒性及其对成骨细胞增殖的影响。方法：实验于2001-01／07在中山医科大学附属第二医院脐血库、医学研究中心以及中山医科大学放免检测中心完成。①制备大鼠含药血清：取雌性SD大鼠18只，随机分为3组，续断组6只，空白对照组8只，雌激素组4只，按体质量分别给予续断生药、生理盐水、雌激素灌胃3d后取血，离心后取上清液。②根据文献方法分离、培养人的原代成骨细胞。③含药血清细胞毒性的观察：成骨细胞按1．0×10^8L^-1密度接种培养24h，换成无血清培养液24h后，用含不同续断浓度（100％，50％。25％，12．5％，6．25％，3％）的大鼠血清处理细胞。采用直接计数法和四氮唑蓝法观察不同浓度续断含药血清的细胞毒性。④细胞增殖的定量分析：将培养人成骨样细胞用不同组大鼠血清稀释，分为5％，10％和20％续断组，5％，lO％和20％雌激素1组，5％，10％和20％空白对照组，5％，10％和20％雌激素2组。采用氚-胸腺嘧啶和四氮唑蓝法检测细胞增殖能力。结果：①续断含药血清细胞毒性的观察结果：直接计数表明含续断血清浓度12．5％和25％时，细胞生长数量最多，四氮唑蓝法测定A值最高。②续断对成骨细胞增殖的影响：氚-胸腺嘧啶掺入法显示10％续断组，10％，20％雌激素1组，各浓度雌激素2组细胞增殖显著高于空白对照组、5％雌激素1组和5％续断组（P〈0．01）；四氮唑蓝法显示10％，20％续断组，10％，20％雌激素1组，10％，20％雌激素2组细胞增殖显著高于空白对照组、5％雌激素1组和5％续断组（P〈0.01）。结论：高剂量续断对成骨细胞增殖产生抑制作用，低剂量无明显影响，中剂量续断对细胞增殖的刺激作用最强。
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