作者：郭国宁; 张正丰; 周跃; 李华壮; 郭志良; ...成纤维细胞骨生成3t3细胞nih3t3成纤维细胞诱导成骨基因转染表型转化western解放军第三军医大学
摘要：目的:观察细胞因子诱导成骨的共同信号分子核心结合因子α1基因转染NIH3T3成纤维细胞,其成骨表型转变的可能性.方法:实验于2003-10/2004-10在解放军第三军医大学新桥医院骨科中心实验室完成.采用脂质体转染技术行核心结合因子α1基因转染NIH3T3成纤维细胞,成骨标志基因Ⅰ型胶原、骨钙素、骨唾液蛋白、碱性磷酸酶、核心结合因子α1 mRNA的表达采用反转录-聚合酶链反应检测,骨钙素的表达采用免疫细胞化学染色检测,Cbfa蛋白的表达采用Westernblot检测.结果:①NIH3T3成纤维细胞经核心结合因子α1基因转染后出现骨钙素、骨唾液蛋白、碱性磷酸酶的表达,Ⅰ型胶原表达增强,说明在转录水平有成骨标志基因的表达.②免疫细胞化学染色检测到了骨钙素的表达,显示NIH3T3细胞已发展为成骨细胞.③Westernblot检测到了核心结合因子α1蛋白的表达,证实了成纤维细胞发生了表型的改变.结论:核心结合因子α1基因转移NIH3T3成纤维细胞改变了成纤维细胞向成骨表型转化,增加了成骨细胞数量,使成骨能力增强成为可能.
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