作者：刘革修; 张洹; 何冬梅细胞低氧小鼠胚胎肝间质细胞内皮生长因子
摘要：目的:观察低氧培养条件下小鼠胎肝间质细胞中血管内皮生长因子的表达情况.方法:实验于2004-08/12在暨南大学医学院血液病研究所完成.取孕14.5 d小鼠胚胎肝细胞进行贴壁培养及传代.生长至次融合状态的第5代细胞分别在体积分数0.95氮气和体积分数0 05二氧化碳混合气和常规条件下培养.在低氧和常氧培养后2,8,16,32 h应用半定量反转录聚合酶链反应和蛋白质印迹技术检测其血管内皮生长因子基因mRNA和蛋白表达.结果:低氧培养2 h时聚合酶链反应产物血管内皮生长因子与β-肌动蛋白信号比明显高于常氧培养[(9.83±3.41)%,(5.47±2.78)%,F=12.33,P＜0.01];低氧培养8 h时血管内皮生长因子mRNA水平达到高峰,为常氧培养的6.17倍;16 h后血管内皮生长因子mRNA表达水平开始下降;32 h时血管内皮生长因子mRNA表达水平进一步下降,血管内皮生长因子与β-肌动蛋白信号比明显高于常氧培养组[(18.95±6 23)%,F=22.76,P＜0.01].低氧培养4 h时血管内皮生长因子蛋白已显著增加,血管内皮生长因子与β-肌动蛋白信号比明显高于常氧培养组[(8.38±3.24)%,F=10.87,P＜0.01];16 h时达到高峰水平,β-肌动;32 h时血管内皮生长因子水平显著下降,血管内皮生长因子与β-肌动蛋白信号比仍明显高于常氧培养组[(17.27±6 35)%,F=19.38,P＜0.01].结论:低氧可诱导血管内皮生长因子在小鼠胎肝间质细胞中表达,提示低氧预处理间质细胞在组织缺血损伤如心肌缺血等疾病可能产生治疗作用.
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