作者：王守力; 韩雅玲; 于海波; 邓捷; 徐凯; 梁...血管平滑肌细胞迁移西洛他唑干预效应基质金属蛋白酶活性基质金属蛋白酶2培养的血管平滑肌细胞细胞迁移能力平滑肌细胞内信号调节激酶沈阳军区总医院蛋白质印记杂交细胞外信号调节细胞内信号调节原代培养
摘要：目的:探讨西洛他唑对原代培养大鼠血管平滑肌细胞迁移能力的影响及其可能的调控作用.方法:实验于2003-03/12在解放军沈阳军区总医院全军心血管病研究所完成.使用胶原酶消化法处理健康雄性SD大鼠,获得原代培养的鼠血管平滑肌细胞,加入终浓度为0.5 μmol/L西洛他唑培养72 h为西洛他唑组,对照组为加入等量的Dulbecco改良的Eagle培养液培养的血管平滑肌细胞.应用细胞刮伤实验和基质金属蛋白酶活性测定分析西洛他唑对原代培养血管平滑肌细胞迁移能力的影响.应用蛋白质印记杂交方法分析给药前后血管平滑肌细胞内基质金属蛋白酶2,9和细胞外信号调节激酶蛋白的表达情况.结果:①细胞刮伤实验显示,与对照组比较,西洛他唑组血管平滑肌细胞迁移能力明显受抑,迁移距离明显缩短.明胶酶活性分析发现,西洛他唑组细胞基质金属蛋白酶活性明显低于对照组.②蛋白质印迹杂交分析发现,西洛他唑可引起原代培养血管平滑肌细胞迁移能力下降.西洛他唑组细胞内基质金属蛋白酶2,9蛋白表达明显低于对照组(14.34±0.70,12.65±0.98;93.67±1.90,83.67±1.05,t=67.86,85.65,P＜0.05).③蛋白质印迹杂交分析检测显示,西洛他唑组与对照组血管平滑肌细胞内信号调节激酶1,2蛋白表达无明显差异(P＞0.05);细胞内磷酸化信号调节激酶蛋白表达明显低于对照组(20.44±0.76,83.67±1.28,t=73.67,P＜0.05).结论:西洛他唑可以有效抑制血管平滑肌细胞迁移,这种抑制作用可能与其对细胞内信号调节激酶活性的影响有关.
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