作者：邹雨汐; 姜晓丹; 徐如祥; 陈剑荣; 黄涛ne神经元样细胞神经干细胞诱导bmsc阳性神经细胞密度梯度离心分化人骨髓基质细胞
摘要：目的:探讨人骨髓源性神经干细胞分化为神经细胞的可行性,为中枢神经组织损伤修复寻找种子细胞的理想来源.方法:无菌取成人髂骨骨髓,密度梯度离心分离后获得骨髓基质细胞(bone marrow stroual cells,BMSCs);在神经干细胞培养液及细胞因子等条件下诱导为神经元样细胞,通过免疫细胞化学方法对诱导后细胞进行鉴定;通过高效液相色谱法(HPLC)检测诱导后细胞合成分泌神经递质去甲肾上腺素(NE)的能力.结果:分离得到的成人BMSCs培养10～14 d后,细胞呈半贴壁状,胞体饱满,Nestin抗原染色阳性.培养20 d后,在诱导因子作用下进一步分化为神经元样细胞(NLCs),具有细长双极或多极突起,神经核蛋白(NeuN)抗原表达阳性.HPLC检测BMSCs、空白神经干细胞培养液未测到NE,经体外诱导培养8,11d的神经干细胞、体外诱导分化20 d的NLCs均可检测到NE,神经干细胞(8,11d)的NE含量为(10.414 6±1.042 5),(28.335 9±3.837 1)μg/L小于NLCs(20 d)组(52.134 2±3.913 6)μg/L,差异有非常显著性意义(F=126.64,P=0.0000).而且随着BMSCs培养天数的增加,其所含的NE浓度也渐增加(P＜0.05).结论:在适宜培养条件及诱导因子联合作用下,人BMSCs可被成功诱导为神经细胞,并具有合成分泌神经递质成分的能力.
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