作者:翁孝刚; 窦敬芳; 王卫民; 陈雪晖; 巩晓辉葡萄糖浓度离体胰岛胰高血糖素孵育液胰岛素分泌刺激垂体腺苷酸环化酶激活肽正常小鼠消化法
摘要:目的:探讨垂体腺苷酸环化酶激活肽-38(pituitary adenylate cyclase ac-tivating polypeptide-38,PACAP-38)对离体正常小鼠胰岛功能的影响.方法:用胶原酶和DNA酶联合消化法分离NMRI小鼠胰岛,RPMI1640组织培养液过夜培养,采用Millipore Multiscreen系统观察不同浓度PACAP-38对胰岛功能的影响.放免法测定孵育液中胰岛素和胰高血糖素浓度.结果:①离体胰岛胰岛素的分泌依赖于孵育液中葡萄糖的浓度,PACAP-38显著刺激胰岛素的释放,且刺激强度依赖于葡萄糖浓度和自身浓度.当孵育液中葡萄糖浓度为5 mmol/L时,PACAP-38在l×10-9mmol/L以上才能显著刺激胰岛素分泌[(6.12±0.26)fmol/(min·胰岛)];而当孵育液中葡萄糖浓度为10 mmol/L时,PACAP-38在1×10-11 mmol/L就可显著刺激胰岛素分泌[(22.87±1.35)fmol/(min·胰岛)](t=4.227 1~7.794 4,P<0.01).②离体胰岛胰高血糖素的分泌明显受到孵育液中葡萄糖的浓度的抑制.在低糖环境(葡萄糖浓度在0和2.5 mmol/L时)中,1×10-9mmol/L PACAP-38可显著抑制胰高血糖素的分泌,且其抑制作用呈明显的浓度依赖型(在葡萄糖浓度为0 mmol/L时,IC50=1×10-10 mmol/L).而当孵育液中葡萄糖浓度为5和10 mmol/L时,1×10-9 mmol/L PACAP-38对胰高血糖素分泌的抑制作用消失.结论:PACAP-38可刺激离体胰岛胰岛素的释放,抑制胰高血糖素的分泌,且其作用具有自身浓度和葡萄糖浓度依赖性.
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