作者:单宏丽; 杨宝峰; 李玉荣; 李永华; 徐长庆自由基豚鼠细胞学技术
摘要:背景:氧自由基诱导的功能异常可能使心脏、肝脏、肾脏及脑等组织缺血性疾病的主要致病因素,对损伤有保护作用的药物研究成为当前的热点.目的:研究红花黄素(Safflower yellow pigment,SYP)对氧自由基引起的豚鼠单个心室肌细胞损伤的保护作用.设计:非随机对照的实验研究.地点、材料和干预:本实验在哈尔滨医科大学药学院药理教研室完成.实验选用豚鼠30只,性别不限.以处置前单个心室肌细胞为正常对照,预先应用红花黄素(3.3μg/L)后,给予单个豚鼠心室肌细胞外源性氧自由基(1 mmol/L的H2O2).主要观察指标:采用全细胞膜片钳技术,观察单个豚鼠心室肌细胞动作电位时程(action potential duration APD)和L-型钙电流、内向整流钾电流.结果:1 nnnol/L的H2O2导致豚鼠心室肌细胞损伤,表现为动作电位时程缩短,APD50和APD90分别由正常对照组的(331.2±31.9)ms和(380.8±28.2)ms缩短至(169.5±76.0)ms和(238.4±21.3)ms(n=8,t=3.834,P<0.01),红花黄素(3.3μg/L)能明显改善H2O2诱发的动作电位时程缩短;同时氧自由基H2O2抑制L-型钙电流,+10mV时,L-型钙电流峰值由对照的(-1023.45±74.34)pA减少到(-275.21±38.67)pA(n=6,P<0.001);H2O2(1 mmol/L)也明显抑制内向整流钾电流(IK1),指令电位为-120 mV时,IK1由对照组的(-2 133.5±570.4)pA降低到(-567.0±218.0)pA.预先应用红花黄素10 min后,外源性氧自由基引起单个豚鼠心室肌细胞L-型钙电流的抑制作用得以改善,但不能改变H2O2对Ik1的抑制作用.结论:预先应用红花黄素对H2O2损伤有一定的拮抗作用,说明其能够清除氧自由基,为临床应用治疗缺血性心脏病和康复措施的介入提供理论依据.
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