作者:曲喜英; 张海风; 祝其锋h2o2pc12细胞基因表达阿尔茨海默病神经元凋亡
摘要:目的:探讨H2O2对PC12细胞par-4和caspase-3基因表达的影响,为阿尔茨海默病神经元凋亡发生的机制提供实验依据.方法:用不同剂量H2O2(0~400 nmol/L)处理PC12细胞8 h,或终浓度200 nmol/L H2O2处理PC12细胞不同时间(0-8 h),采用RT-PCR检测par-4,caspase-3 mRNA表达变化,Western blot检测Par-4蛋白表达和Caspase-3P20活性片段的变化,用比色法检测Caspase-3相对活性.结果:随H2O2浓度从100~400 nmol/L增加,par-4,caspase-3mRNA表达和Par-4蛋白表达水平及Caspase-3 P20活性片段逐渐增加;200 nmol/LH2O2作用PC12细胞0~8 h,par-4 mRNA表达和Par-4蛋白表达,在2~8 h随时间延长表达增加;caspase-3 mRNA表达和Caspase-3 P20活性片段,在4~8 h随时间延长而增加;随H2O2浓度从50~400 nmol/L增加,Caspase-3相对活性增加(x2=4.8,P<0.05),在400 nmol/LH2O2时Caspase-3相对活性达最大值.结论:随着H2O2剂量依赖性的增加和同一剂量下H2O2处理PC12细胞时间增加par-4,caspase-3基因mRNA的表达,Par-4蛋白的表达,Cas-pase-3 P20活性片段,Caspase-3活性均有所增加.
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