作者：于进; 王海昌; 刘源; 金岩骨髓基质细胞血管内皮细胞细胞分化体外培养表皮细胞生长因子碱性成纤维细胞生长因子
摘要：目的:研究骨髓基质细胞(marrow stromal cells,MSCs)向血管内皮细胞分化的可能性,以及内皮细胞特异性标志的表达.方法:实验选用7周龄清洁级雄性SD大鼠4只,抽取SD大鼠骨髓,进行体外培养和连续传代,获得较纯的MSCs.采用第4代的MSCs,以内皮细胞无血清条件培养液,表皮细胞生长因子(epidermal growth factor,EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growthfactor,bFGF)进行体外诱导,相差显微镜下观察各组细胞形态变化,以免疫组化方法鉴定内皮细胞特征样蛋白Ⅷ因子的表达阳性率,并通过透射电镜观察内皮细胞特异性W-P小体.结果:诱导前MSCs多呈扁平、多突起形态,诱导后形态均发生变化,10 d细胞呈扁圆形,20 d后细胞之间渐呈集落状、铺路石样排列.免疫组化检测Ⅷ因子阳性比例接近70%.透射电镜显示诱导后细胞内出现内皮细胞特异性W-P小体.结论:成体中的MSCs在一定诱导条件下可以表现内皮细胞样特征,是临床治疗缺血性疾病理想的移植用种子细胞.
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