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杞精明目汤含药血清对结膜松弛症MAPK信号通路的影响

作者:贾元玲; 项敏泓; 黄丽; 李青松; 文杭; 詹...结膜松弛症丝裂原活化蛋白激酶杞精明目汤含药血清成纤维细胞

摘要:目的探讨杞精明目汤含药血清对结膜松弛症(CCh)成纤维细胞表达丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的影响及其作用机制。方法体外培养结膜松弛症结膜成纤维细胞并鉴定,分为CCh对照组、CCh+20%含药血清组(含药血清组)、CCh+20%无药血清组(无药血清组),予20%的含药或无药血清干预48 h。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测p38MAPK、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、细胞外信号调节激酶(ERK)及其磷酸化水平的光密度值,Western Blot检测p38 MAPK、JNK、ERK蛋白及其磷酸化水平,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测p38 MAPK、JNK、ERK的m RNA表达,并行统计学分析。结果 ELISA结果显示:含药血清组较CCh对照组p38 MAPK、p-p38 MAPK光密度值明显降低(P〈0.05),而无药血清组与CCh对照组差异无统计学意义(P〉0.05)。含药血清组较CCh对照组JNK光密度值降低(P〈0.05),而无药血清组与CCh对照组差异无统计学意义(P〉0.05);含药血清组、无药血清组较CCh对照组p-JNK光密度值下降(P〈0.05)。含药血清组较CCh对照组ERK、p-ERK光密度值下降,差异有统计学意义(P〈0.05);而无药血清组与CCh对照组差异均无统计学意义(P〉0.05)。Western Blot结果显示:含药血清组、无药血清组较CCh对照组p-p38MAPK蛋白表达量明显下降(P〈0.05),且20%含药血清的p38 MAPK蛋白磷酸化水平下调更为明显。含药血清组、无药血清组与CCh对照组JNK、p-JNK蛋白表达量差异无统计学意义(P〉0.05)。含药血清组、无药血清组与CCh对照组ERK蛋白表达量差异无统计学意义(P〉0.05);含药血清组、无药血清组较CCh对照组p-ERK蛋白表达量均明显降低(P〈0.05),其中含药血清组的ERK蛋白磷酸化水平下调更为明显。RT-PCR结果显示:无药血清组和含药血清组较CCh对照组p38 MAPK、JNK、ERK的m RNA表达水平均显著下降,差异有统计学意义(P〈0.05

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