作者：汪园; 高燕会; 朱玉球; 斯金平铁皮石斛dccdpk8启动子瞬时转染组织化学染色
摘要：铁皮石斛钙依赖性蛋白激酶基因DcCDPK8参与低温激素ABA和MeJA的信号转导过程,但转录调控尚不明确,为了研究铁皮石斛DcCDPK8基因的核心启动子区域,并对其转录调控机制进行探讨,采用PCR技术克隆铁皮石斛DcCDPK8基因启动子序列,并利用5’端缺失和GUS基因的融合表达研究启动子序列功能。结果表明DcCDPK8基因启动子序列含有1个低温响应元件LTR(-1 749~-614 bp),2个茉莉酸甲酯响应元件(-1 749~-230 bp)和1个ABA响应元件(-614~-230 bp),构建3个5’端不同缺失片段融合GUS报告基因的p BI121真核表达载体,瞬时转化烟草叶片,经低温胁迫后GUS活性强弱为DcCDPK8-p1>DcCDPK8-p2> DcCDPK8-p3,经外源ABA诱导后GUS活性DcCDPK8-p1> DcCDPK8-p2> DcCDPK8-p3,而经外源MeJA诱导后GUS活性DcCDPK8-p1>DcCDPK8-p2>DcCDPK8-p3,推测DcCDPK8基因启动子序列中ABA响应元件(ARE)对外源ABA的响应起正调控作用,而MeJA顺式作用元件对外源茉莉酸甲酯响应起抑制作用。
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