作者：郝俊龙; 王亚鹏; 杨凯; 齐进; 王旭; 汪静骨肉瘤mg63细胞迁移
摘要：目的：探讨葡萄糖转运蛋白-1（glucose transporter-1,Glut-1）通过Wnt/β-catenin通路促进骨肉瘤细胞MG63的迁移及其机制。方法：构建针对Glut-1基因的RNA干扰重组腺病毒（Ad-Glut-si RNA）及含对照序列的重组腺病毒（Ad-GFP）,感染MG63细胞沉默Glut-1基因表达;通过Transwell小室法检测Blank组、Ad-AFP组、Ad-Glut-si RNA组、GSK-3抑制剂AZD2858组细胞的迁移能力;应用免疫荧光实验检测各组细胞E-钙黏蛋白（E-cadherin）、波形蛋白（vimentin）的表达变化以及β-连环蛋白（β-catenin）的进核情况,通过Western blotting实验检测各组细胞的MMP-2、MMP-9表达变化以及Blank组、Ad-AFP组、Ad-Glut-si RNA组细胞FZD7、β-catenin、Dsh蛋白表达变化。结果：沉默Glut-1基因后,MG63细胞迁移能力明显下降（P〈0.05）;再给于AZD2858处理后,细胞的迁移能力恢复（P〈0.05）。与Blank组和Ad-GFP组细胞相比,Ad-Glut-si RNA组MG63细胞E-cadherin表达显著升高（P〈0.05）,vimentin、MMP-2、MMP-9以及FZD7、β-catenin、Dsh蛋白表达显著降低（均P〈0.05）;与Ad-Glut-si RNA组相比,AZD2858组细胞E-cadherin表达显著降低（P〈0.05）,vimentin、MMP-2和MMP-9表达显著升高（P〈0.05）。结论：Glut-1基因高表达与骨肉瘤MG63细胞侵袭转移具有密切联系,其可能机制在于Glut-1高表达后激活Wnt/β-catenin通路使EMT相关蛋白Ecadherin表达降低、vimentin以及MMP-2、MMP-9含量上升,从而促进MG63细胞的转移。
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