作者：曾贤铭; 仲人前; 周琳; 杨再兴; 梁艳; 蒋...b淋巴细胞活化因子适体单链dna指数富集的配体进化技术进化
摘要：目的：进化筛选与B淋巴细胞活化因子（B cell activating factor be longing to the TNF family,BAFF）特异结合的单链DNA适体,鉴定其结合力。方法：应用指数方式富集的配体系统进化（systemati cevolution of ligands by exponential enrichment,SELEX）技术,将随机序列寡核苷酸文库与BAFF分子相互作用,分离出结合的寡核苷酸配体,经反复扩增、筛选数个循环,获得重组人BAFF的单链DNA适体,应用Dot blotting鉴定其结合力,酶联法比较各适体序列对BAFF的相对结合力。结果：优化实验条件后成功进行了13轮次筛选,随机选取42个阳性克隆测序,各序列GC含量最高达75%,分为6类不同序列;Dot blotting证实这些适体均与BAFF相结合;比较各适体序列结合BAFF的光密度值,以序列44光密度值最高（0.752,P〈0.05）,具有对BAFF相对最高结合力。结论：首次成功获得特异结合BAFF的高亲和力的单链DNA适体,为研发防治肿瘤和自身免疫疾病新药奠定了基础。
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