作者:郑洪玲; 金宁一; 李霄; 米志强; 连海; 李...凋亡素基因人白介素18基因结肠癌细胞线粒体凋亡
摘要:目的:探讨联合应用凋亡素(apoptin)基因、新城疫病毒(newcastle disease virus,NDV)血凝素-神经氨酸酶(hemagglutinin-neuramidinase,HN)基因及人白介素18(hIL-18)基因体外对人结肠癌细胞HCT—116的抑制效应。方法:重组质粒pIRApoptinHNIL18通过脂质体介导法体外转染人结肠癌细胞HCT—116,通过Western blotting和RT—PCR检测外源基因表达;采用AO/EB染色法检测pIRApoptinHNIL18对人结肠癌细胞HCT—116抑制作用;利用流式细胞术分析pIRApoptinHNIL18对人结肠癌细胞HCT—116线粒体膜电位(mitochondrial transmembrane potential,△ψ)和活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;采用3,5-二羟基甲苯法测定唾液酸含量。结果:pIRApoptinHNIL18转染人结肠癌细胞HCT—116后,外源基因能够有效表达;肿瘤细胞生长受到抑制;线粒体△ψ由(94.41±8.17)%下降到(30.70±8.01)%(P〈0.05);唾液酸含量由(0.33±0.06)mmol/L下降到(0.09±0.03)mmol/L(P〈0.01);ROS水平由(52.48±6.09)%升高到(68.98±7.26)%(P〈0.05)。结论: 可通过线粒体途径诱导细胞凋亡,从而抑制人结肠癌细胞HCT—116的生长。
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